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酶制劑生產(chǎn)培養(yǎng)基與高效發(fā)酵消泡劑

分類(lèi):行業(yè)新聞 發(fā)布時(shí)間:2012-11-23 瀏覽量:13

碳源碳素化合物是微生物細(xì)胞的重要建造材料、能源和酶的組成部分,也是多種誘導(dǎo)酶的誘導(dǎo)物。不同微生物要求的高效發(fā)酵消泡劑與碳源不同,是由菌種自身的酶系所決定,綜合起來(lái)有如下幾點(diǎn)值得注意:①葡萄糖、蔗糖等易利用的碳水化合物,對(duì)促進(jìn)細(xì)胞的呼吸與生長(zhǎng)有利,高濃度下對(duì)產(chǎn)酶有抑制作用,用;②有些微生物不能利用復(fù)雜的碳水化合物,必須使用葡萄糖等簡(jiǎn)單的碳水化合物時(shí),可采用流加法等避免出現(xiàn)“葡萄糖效應(yīng)”現(xiàn)象;③有時(shí)近似的碳源,也會(huì)因某些原因,出現(xiàn)不同的產(chǎn)酶情況。此外,碳源類(lèi)型除了影響產(chǎn)酶外,還能影響微生物胞內(nèi)酶與胞外酶的比例。誘導(dǎo)方法有:
  ①直接誘導(dǎo)法,即將誘導(dǎo)劑直接加入培養(yǎng)基中,高效發(fā)酵消泡劑使之發(fā)酵產(chǎn)酶;
  ②兩步培養(yǎng)誘導(dǎo)法,先將微生物接種在不含誘導(dǎo)劑的培養(yǎng)液中,繁殖大量菌絲,在產(chǎn)酶期,把菌體轉(zhuǎn)入含誘導(dǎo)劑與高效發(fā)酵消泡劑的培養(yǎng)液中,使之大量合成酶。兩步法提高產(chǎn)酶的原因,可能是這種方法可以避免分解代謝物阻遏,使誘導(dǎo)物能充分發(fā)揮其誘導(dǎo)作用;
  ③二次誘導(dǎo)法。若在培養(yǎng)液中先加少量棉籽糖,使之起預(yù)誘導(dǎo)作用,然后在菌體進(jìn)入大量合成酶的生長(zhǎng)時(shí)期,再加入適量的乳糖,進(jìn)行二次再誘導(dǎo),可能合成較多的ɑ-半乳糖苷酶。
氮源氮源對(duì)于微生物生長(zhǎng)與高效發(fā)酵消泡劑產(chǎn)酶呈現(xiàn)4種情況:①既促進(jìn)微生物生長(zhǎng),又促進(jìn)產(chǎn)酶;②只促進(jìn)微生物生長(zhǎng),不促進(jìn)產(chǎn)酶;③只促進(jìn)產(chǎn)酶,不促進(jìn)微生物生長(zhǎng);④既不促進(jìn)微生物生長(zhǎng),又不促進(jìn)產(chǎn)酶。在嚴(yán)格選定氮源類(lèi)型之后,還應(yīng)當(dāng)注意碳源濃度,即碳氮比、無(wú)機(jī)氮與有機(jī)氮的濃度比例、無(wú)機(jī)氮的種類(lèi)等。無(wú)機(jī)鹽有些金屬離子本身就是酶的組成部分。鹽對(duì)產(chǎn)酶的效應(yīng)比較復(fù)雜,擇重要的分述如下:
  ①磷:多數(shù)情況對(duì)產(chǎn)酶有促進(jìn)作用,在蛋白酶中比較明顯。
  ②鈣:Ca2+對(duì)蛋白酶有明顯的保護(hù)和穩(wěn)定作用。如無(wú)Ca2+存在時(shí),灰色鏈霉菌中性蛋白酶只在pH7-7.5很狹窄的范圍內(nèi)穩(wěn)定,當(dāng)有Ca2+存在時(shí),穩(wěn)定pH范圍擴(kuò)大到5-9;在Ca2+存在下,枯草桿菌中性蛋白酶在pH 5.5-10可以穩(wěn)定數(shù)小時(shí),其反應(yīng)最適溫度可以提高到57℃。
  ③ Na+,Cl-對(duì)提高枯草桿菌液化型ɑ-淀粉酶的耐熱性的作用尤為顯著。
  ④添加適量的Mg2+,Zn2+,Mn2+,F(xiàn)e2+等能提高蛋白酶和ɑ-淀粉酶等的產(chǎn)酶量。D-木糖異構(gòu)酶需要二價(jià)金屬離子才有活力,不同菌種需Mg2+,Mn2+和Co2+等,在一種情況下,一種離子可能是活化劑,在另一種情況下卻成了抑制劑,不同的酶往往需要不同的離子與高效發(fā)酵消泡劑作它的活化劑。
  ⑤一般說(shuō)金屬和重金屬離子對(duì)酶活力有抑制,若有適當(dāng)濃度的Mg2+,Co2+上共存時(shí),可減輕有害離子的抑制作用。
生長(zhǎng)因素多種氨基酸維生素是微生物生長(zhǎng)與高效發(fā)酵消泡劑產(chǎn)酶的必要成分,有些維生素甚至就是酶的組成部分。麥芽根、酵母膏、麥芽汁中均含有不同程度的微量生長(zhǎng)因素,對(duì)促進(jìn)產(chǎn)酶有顯著效應(yīng)。其它產(chǎn)酶促進(jìn)物質(zhì)還有植酸鹽、表面活性劑、高效發(fā)酵消泡劑、活性炭、羧甲基纖維素及其水解物、大于12個(gè)碳原子的脂肪酸、某些有機(jī)酸、大豆的酒精提取物等等。本文參考《發(fā)酵工程原理與技術(shù)》一書(shū)。

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