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賴氨酸發(fā)酵用消泡劑生產(chǎn)工藝

分類:行業(yè)新聞 發(fā)布時(shí)間:2012-09-18 瀏覽量:7

發(fā)酵生產(chǎn)賴氨酸的原料有糖質(zhì)、醋酸、正構(gòu)石蠟、乙醇等。以糖質(zhì)原料為例,生產(chǎn)概況如下:賴氨酸發(fā)酵的種子及發(fā)酵培養(yǎng)基組成①溫度:種子培養(yǎng)溫度30-32℃,發(fā)酵溫度32-34℃。發(fā)酵前期提高溫度,生長代謝加快,反應(yīng)速度加大,產(chǎn)酸期提前,但菌體的酶容易失活,表現(xiàn)在菌體易于衰老,發(fā)酵周期縮短,影響賴氨酸產(chǎn)量。
  ②氧氣:在賴氨酸發(fā)酵用消泡劑發(fā)酵的過程中,并不需要培養(yǎng)基中的氧濃度達(dá)到飽和,只要維持在臨界氧濃度之上即可,賴氨酸發(fā)酵的P臨界=0.0103X105 Pa。發(fā)酵初期攪拌通風(fēng)強(qiáng)度太高,則三羧酸循環(huán)中有關(guān)的脫氫酶活力受阻,而賴氨酸的合成能力降低。
賴氨酸發(fā)酵兩個(gè)階段第一階段0-24h為長菌期;第二階段24-72 h為產(chǎn)酸期,耗糖加快,產(chǎn)酸迅速,pH下降。賴氨酸的高糖發(fā)酵可改為高糖流加法發(fā)酵(例如,初糖為75g/L,20h后流加75g/L),這是因?yàn)椋撼跆菨舛忍邥r(shí),菌種接種后的適應(yīng)期延長,比生長速率增加,賴氨酸生成速度降低。初糖濃度提高,異檸檬酸脫氫酶活力降低,而蘋果酸脫氫酶、乳酸脫氫酶及谷氨酸脫氫酶活力均顯著提高。異檸檬酸脫氫酶的活力大小直接與賴氨酸的生成有關(guān),要提高異檸檬酸脫氫酶的活力,就要降低糖的濃度,所以初糖太高不利。當(dāng)采用流加法時(shí),異檸檬酸脫氫酶活力一直到發(fā)酵終了時(shí)仍能維持較高水平,賴氨酸生成比高糖發(fā)酵有提高。此外,還采用氮源流加的方法,由于賴氨酸發(fā)酵用發(fā)酵消泡劑發(fā)酵時(shí),需維持高氮量,例如,總氮量需加(NH4)2SO44%-4.5%,如全部作初氮加入,賴氨酸的產(chǎn)量不及2%-3%(NH4)2SO4的為高,如中間流加,總氮量可達(dá)4.5%-6%,則產(chǎn)量顯著提高。國外對(duì)賴氨酸生產(chǎn)做了大量工作,添加某些物質(zhì)有一定的增產(chǎn)效果,但到目前為止,有些作用機(jī)制尚不清楚。賴氨酸的提取L-賴氨酸發(fā)酵用消泡劑發(fā)酵液的提取有以下幾種:晶析法、加合物法、離子交換法、電滲法和一些其它法。調(diào)節(jié)pH提取L-賴氨酸的晶析法 :
  通過將賴氨酸發(fā)酵用消泡劑及發(fā)酵醪pH調(diào)整到3-7,以滿足以下兩個(gè)條件: X≥0. 32及XY≥0.32,其中X=賴氨酸(作為堿基)的總重百分?jǐn)?shù)與發(fā)酵醪干物質(zhì)總重百分?jǐn)?shù)的比,XY=把PH調(diào)整到上述值后發(fā)酵醪中無水HCl數(shù)對(duì)賴氨酸數(shù)的摩爾比例,賴氨酸就成兩個(gè)結(jié)晶水的單鹽酸鹽的結(jié)晶,例如,分去菌體,含5.46g/100ml L-籟氨酸的X=0.46,發(fā)酵醪用鹽酸調(diào)節(jié)PH至3.6(XY=0.48),將混合物真空濃縮到1 076 g,再讓它在6h內(nèi)冷卻至21℃。攪拌過夜后,用離心機(jī)分出結(jié)晶狀產(chǎn)物,得到291g的含98.7%的賴氨酸HCl·2H2O半干固體。
賴氨酸的離子交換法提取
強(qiáng)酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂之氫型RSO3H及銨型RSO3NH4均可吸附賴氨酸,但銨型樹脂能選擇性的吸附賴氨酸及其它堿性氨基酸(如精氨酸、鳥氨 酸)而不吸附其它中性氨基酸及酸性氨基酸,因賴氨酸發(fā)酵用消泡劑發(fā)酵液中很少有精氨酸,故能比較容易地與其它氨基酸分離。
洗脫劑的選用①氦水洗脫:用2 mol/L以上氨水洗脫時(shí),洗脫液中賴氨酸含量高峰在8%左右口10 mol/L,氨水洗脫時(shí),賴氨酸含量高峰可達(dá)16%-20%。
  ②用氮及氯化銨混合水溶液洗脫:以氨水進(jìn)行洗脫時(shí),樹脂上被吸附的陽離子,除堿性氨基酸能洗脫以外,而包含在發(fā)酵液中的陽離子,如Na+,Ca2+,Mg2+,大多不能洗脫而殘存于樹脂中,隨著操作次數(shù)的增加而積累,因而影響氨基酸的吸附量,致使樹脂交換能力下降。
積累在樹脂上的金屬離子,必須用酸或食鹽水再生,在洗脫劑中使用含有氨及氯化銨的混合水溶液有以下優(yōu)點(diǎn):①堿性氨基酸以外的無機(jī)陽離子也被洗脫,提高樹脂的交換容量并可反復(fù)使用;②在堿性氨基酸被洗脫后才開始洗脫無機(jī)陽離子,可以通過分別收集,不使氨基酸發(fā)酵用消泡劑中雜質(zhì)含量增加;③通過調(diào)節(jié)氯化銨用量,使堿性氨基酸與氯化銨的摩爾比在1:1左右,使賴氨酸成為鹽酸鹽而不需要再中和。若氯化銨的摩爾數(shù)多于堿性氨基酸的摩爾數(shù),則過剩的氯化銨給精制造成困難。本文參考《發(fā)酵微生物學(xué)》一書。

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